Celiško gleivių proteominis profilis: naujas žvilgsnis į nevaisingumo diagnostiką Lietuvoje

Celiškos gleivės (CG) yra klampus skystis, gaminamas gimdos kaklelio liaukų, atliekantis gimdos kaklelio kamščio funkciją. Ovuliacijos metu jo klampumas sumažėja, sudarydamas galimybę neinvaziniam mėginių paėmimui. Šis tyrimas sutelkia dėmesį į CG proteominę charakteristiką, siekiant įvertinti jos potencialą kaip neinvaziniu būdu gaunamą žymenų šaltinį ir suprasti moters lytinių takų molekulinę (patofiziologiją). Pirminis šio darbo tikslas buvo optimizuoti CG apdorojimo eksperimentinę darbo eigą, o antrasis - įvertinti CG proteominės sudėties skirtumus natūralių ovuliacijos ciklų metu, gautus išsėtinių inseminacijos (IUI) ciklų ir apvaisinimo in vitro (IVF) ciklų su kontroliuojama kiaušidžių stimuliacija. Proteominė CG mėginių analizė atskleidė 4370 baltymų, susijusių su procesais, įskaitant neutrofilų degranuliaciją, ląstelių streso atsakus ir hemostazę. Diferencinė ekspresijos analizė parodė, kad 199 baltymai buvo labiau paplitę IUI mėginiuose, o 422 - IVF mėginiuose. IUI mėginiuose randami baltymai buvo susiję su fosfatidinės rūgšties sinteze, atsaku į išorinius dirgiklius ir neutrofilų degranuliacija, o IVF mėginiuose - su neutrofilų degranuliacija, raginio apvalkalo formavimu ir hemostaze.

Įvadas į celiško gleivių svarbą reprodukcinėje biologijoje

Celiško gleivės yra sudėtingas gelis, kuriame gausu glikoproteinų, lipidų, nukleorūgščių ir metabolitų. Jo biologinė funkcija labai priklauso nuo makromolekulinės sudėties. Gleivės atlieka gyvybiškai svarbų vaidmenį apsaugant makšties epitelį lytinių santykių metu ir užtikrinant gimdos ertmės apsaugą, taip padedant užtikrinti vaisingumą [1], spermatozoidų kapaciaciją ir ribojant spermatozoidų patekimą į moters reprodukcinį traktą (MRT) iki periovuliacinio laikotarpio. Tačiau jo funkcijos dar nėra iki galo suprastos. Be to, celiško gleivių biologinės ir cheminės-fizinės savybės keičiasi per mėnesinių ciklą [1,2]: glikoproteinų (mucino) kiekis pasiekia piką arti ovuliacijos dėl didelės sekrecijos, tačiau kitų baltymų gausa yra didžiausia luteinės fazės metu [3]. Pirmoje ciklo pusėje gleivės yra skurdžios, tirštos ir klampios, sudarančios barjerą ar gimdos kaklelio kamštį, kuris riboja spermatozoidų patekimą į viršutinius lytinius takus. Tuomet, prieš pat ovuliaciją, kai vis daugiau gaminama estrogenų, jo klampumas mažėja, o tūris padidėja 10-20 kartų, taip padidinant jo pralaidumą spermatozoidams.

Celiško gleivių sudėtis pasikeičia iškart po ovuliacijos, kai kiaušidžių geltonkūnis pradeda gaminti progesteroną. Progesteronas mažina celiško gleivių kiekį ir sudėtį, paversdamas jį tirštesniu ir lipšnesniu [4]. Biocheminiai šių pokyčių mechanizmai yra menkai suprantami, tačiau žinoma, kad pakitimai polisacharidų grandinių (glikanų) skaičiuje ir tipuose, pridedamuose prie baltymų posttransliacinės modifikacijos metu, gali drastiškai padidinti baltymų molekulinį svorį ir taip pakeisti jų tirpumą, tirpalo klampumą ir biologinę funkciją. Gimdos ertmė, tiesiogiai sujungta su gimdos kakleliu, yra padengta endometriumo audiniu, kuris fiziologiškai persitvarko veikiant kiaušidžių hormonams. Žmogaus gimdos proteomas per mėnesinių ciklą buvo tiriamas analizuojant tiek endometriumo epitelį [5], tiek gimdos skystį [6]. Tačiau gimdos skysčio proteomo variacijos ciklo eigoje nežinoma. Be to, kadangi gimdos ertmė išskiria medžiagas į gimdos skystį, kurios gali paveikti visą reprodukcinę sistemą, celiško gleivių proteomas gali atspindėti endometriumo audinio [7], o potencialiai ir kiaušintakių bei kiaušidžių funkcinę būklę. Taigi, celiško gleivių analizė galėtų suteikti vertingos informacijos, padedančios diagnozuoti, prognozuoti ir gydyti moters lytinių takų sutrikimus. Ankstyvas žymenų aptikimas gimdos skystyje, esančiame arti sergančių audinių, gali pakeisti arba papildyti veninį kraują, taip padidindamas aptikimo jautrumą ir, savo ruožtu, terapinių pasirinkimų, prieinamų asmenims, sergantiems ligomis, spektrą, leisti efektyvesnį ankstyvą gydymą ir palengvinti patogenezėje dalyvaujančių veiksnių identifikavimą.

Ankstesni tyrimai ir dabartinio tyrimo reikšmė

Tačiau tik nedaugelis tyrimų tyrė celiško gleivių baltymų sudėtį. Andersch-Björkman ir kt. [8] atliko išsamią celiško gleivių mėginių, paimtų iš 12 moterų įvairiose mėnesinių ciklo stadijose (prieš, per ir po ovuliacijos), proteominę ir glikominę LC-MS analizę, o Panicker ir kt. optimizavo SELDI-TOF (paviršiumi sustiprintos lazerinės desorbcijos/jonizacijos su laiko skrydžio masių analizatoriumi) MS metodą celiško gleivių analizei [9]. Be to, Grande ir kt. patvirtino, kad celiško gleivės yra turtingas baltymų žymenų šaltinis, nustatė penkių vaisingų moterų, kurioms per metus iki tyrimo buvo gimdymas, celiško gleivių mėginių baltymų sudėtį ir apibūdino celiško gleivių proteomo pokyčius per mėnesinių ciklą [10]. Kito tyrimo metu, atlikus aukštos rezoliucijos masės spektrometrinę celiško gleivių analizę iš dešimties nevaisingų moterų su kiaušidžių endometrioidinėmis cistomis, nustatyta, kad ši lėtinė liga pasižymi uždegiminių baltymų ekspresija [11]. Otani ir kt. (2019) apibūdino citokinų (IFN-gamma, CM-CSF, RANTES ir eotaxino) ekspresijos lygių pokyčius celiško gleivėse pacientei su gimdos kaklelio displazija ir gimdos kaklelio vėžiu [12]. Galiausiai, Rocconi ir kt. (2021) neseniai analizavo celiško gleivių proteomą kiaušidžių vėžio atrankos tikslais [13], o Finan ir kt. (2012) nustatė 10 celiško gleivių baltymų, kurie gali būti naudojami patikimai diagnozuojant endometriumo vėžį [14]. Šie rezultatai aiškiai rodo, kad celiško gleivių proteomas turi informacijos, kuri gali būti vertinga diagnozuojant įvairias patologijas ir anomalijas žmonėms.

Nors anksčiau buvo pranešta apie kelias celiško gleivių proteomines analizes, tyrimams dažnai trūko didelio pacientų skaičiaus, o keli tyrimai mėginius ėmė nepaisant mėnesinių ciklo fazės. Normalaus celiško gleivių proteomo apibrėžimas yra ypač sudėtingas, nes žinome, kad jo sudėtis labai priklauso nuo kiaušidžių ciklo ir estrogenų lygio. Siekiant standartizuoti biologinės medžiagos ėmimą, atlikome neinvazinį celiško gleivių ėmimą per periovuliacinį laikotarpį pas sveikų moterų, kurioms atliekama dirbtinė inseminacija arba apvaisinimas in vitro (IVF) dėl vyrų nevaisingumo. Buvo atlikti eksperimentai, siekiant nustatyti, ar pašalinus celiško gleives per intrauterininę inseminaciją (IUI) gali padidėti nėštumo rodikliai [15], ir yra įrodymų, kad klomifeno citratas (vaistas, naudojamas kiaušidžių stimuliacijai IVF vaisingumo gydyme) gali pakeisti celiško gleivių kokybę [16,17]. IUI grindžiama moterų natūraliais ciklais, todėl atspindi normalią celiško gleivių biologiją, o IVF stimuliuoti ciklai atstovauja celiško gleivių „modelio sistemą“, kurioje hormoninis medikamentas skiriamas standartizuotu laiku, leidžiančiu labai tiksliai prognozuoti ovuliacijos laiką, todėl galima paimti celiško gleivių mėginius tiesiai ovuliacijos metu.

Pacientų charakteristikos ir duomenų kokybės kontrolė

Šiame tyrime dalyvavo dvi pacientų grupės: IUI grupė, kuriai buvo atliekama intrauterine inseminacija be hormonų stimuliacijos, ir IVF grupė, kuriai buvo atliekamas apvaisinimas in vitro su stimuliuotais ciklais. Pacientų amžius, ūgis, svoris ir rūkymo statusas buvo gauti per pirmąjį vizitą, AMH ir FSH analizavo iš periferinio kraujo, o gimdos gleivinės storis buvo nustatytas ultragarsu kiaušialąsčių paėmimo procedūros metu. Nėštumo rodikliai buvo apibrėžti kaip kliniškai patvirtintas nėštumas.

LC-MS visų tirtų mėginių analizės buvo atliktos vienoje partijoje. Analizių stabilumas buvo retrospektyviai įvertintas naudojant dvigubai įkrautą peptidą YICDNQDTISSK kaip etaloninį analitą. Šis peptidas turėjo retencijos laiką 29,22 ± 0,32 min (1% RSD), FWHM 0,13 ± 0,007 min (5,5% RSD), maksimalų piko aukštį 6,19 × 108 ± 4,11 × 107 (6,6% RSD) ir vidutinę masės klaidą 0,57 ± 0,57 ppm. Visos šios vertės yra žemiau 15% RSD ribos, paprastai taikomos LC-MS analizėse, o peptido masės klaida buvo žemiau 3 ppm ribos, kurią mūsų įmonė naudoja viduje.

Proteominė celiško gleivių analizė: IUI ir IVF ciklų palyginimas

Galutiniame analizuojamų duomenų rinkinyje, naudojant ProteomeDiscoverer 2.5, iš viso buvo nustatyti 4370 baltymai (1 lentelė), 34 166 peptidai ir 470 013 peptidų spektro atitikimų visuose 19 mėginių. Nustatytų peptidų ir baltymų skaičius reikšmingai skyrėsi tarp IUI ir IVF grupių (1A, B pav.). IUI grupėje vidutiniškai buvo nustatyta 97 ± 70 baltymų (341 ± 260 peptidų) su dideliu pasitikėjimu. Tačiau buvo du išimties mėginiai (I2 ir I5), kuriuose nustatyta 1538 baltymai ir 7668 peptidai. Atvirkščiai, IVF grupėje vidutiniškai buvo nustatyta 1640 ± 428 baltymų (8543 ± 2613 peptidų) su dideliu pasitikėjimu.

Baltymų kiekybinės analizės rezultatai buvo vizualizuoti naudojant PCA balų grafiką (1C pav.) ir šilumos žemėlapį (1D pav.). PCA grafikas ir šilumos žemėlapis nerodė aiškių tendencijų celiško gleivių sudėtyje; pirmoji ir antroji PCA pagrindinės dedamosios paaiškino tik 15,6% ir 10,8% duomenų variacijos. Šilumos žemėlapyje buvo du pagrindiniai klasteriai: viename buvo tik IUI mėginiai, o kitame - mėginiai iš abiejų grupių. Tai rodo, kad hormonų stimuliacijos poveikis celiško gleivių sudėčiai yra mažesnis nei kitų veiksnių įtaka.

Minora funkcijų detektorius [18] pasirodė esąs labai naudingas kiekybinėje celiško gleivių proteominių duomenų analizėje. Šis ProteomeDiscoverer mazgas atlieka peptidų identifikavimą remdamasis tandeminių masių spektrais, susiejant pikus vieno mėginio spektre su atitinkamais retencijos laikais ir tėviniais peptidų masėmis kituose mėginiuose, taip efektyviai sumažinant trūkstamų verčių skaičių rezultatuose. Taikant mūsų duomenims, jis padidino kiekybiškai įvertintų baltymų skaičių mėginiuose su nepakankamomis identifikacijomis (ty, tik apie 200 baltymų, identifikuotų su aukštu balu). Kiekybinėje analizėje nustatytų baltymų skaičius viršijo pradinius mėginiuose nustatytus skaičius, kaip matyti 1E pav. pateiktoje vandens kritimo grafikoje. Be to, normalizuota baltymų gausa IUI grupėje buvo aiškiai didesnė nei IVF grupėje ir bendrame proteome. Taigi, nors IUI mėginiuose buvo mažiau skirtingų baltymų nei IVF mėginiuose, esantys baltymai buvo gausiau paplitę. Mažas baltymų skaičius IUI grupėje galėtų būti, pavyzdžiui, dėl baltymų, turinčių kintamą molekulinį svorį, išraiškos ir taip pakeistos difuzijos gebos į IUI, palyginti su IVF mėginiais, celiško gleives. Norint patikrinti šią hipotezę, sutelkėme dėmesį į 63 baltymus, kurie buvo kiekybiškai įvertinti visuose visų mėginių pakartojimuose, ir apskaičiavome jų molekulinio svorio ir išmatuotos gausos koreliaciją (1F pav.). Tačiau tai neparodė reikšmingų skirtumų tarp IUI ir IVF grupių.

Taikant bendrus kriterijus, skirtiems nustatyti paplitusius baltymus (log2 pokytis ne mažesnis kaip 1 ir p vertė mažesnė kaip 0,05), nustatėme 199 ir 422 baltymus, kurie buvo paplitę IUI (2 lentelė) ir IVF mėginiuose (3 lentelė) atitinkamai. Šie skaičiai yra didesni nei vidutinis nustatytų baltymų skaičius IUI mėginiuose. Todėl ištyrėme kiekybiškai įvertintų baltymų neimputuotus duomenis IUI ir IVF paplitusių baltymų grupėse. Rezultatas, kad IUI mėginiuose buvo nustatyta mažiau baltymų, buvo patvirtintas IVF paplitusių baltymų rezultatais, iš kurių 214 buvo specifiniai IVF grupei. Dar 34 baltymai buvo tik IVF grupėje ir teigiamuose išimties mėginiuose I2 ir I5 iš IUI grupės, o likę IVF paplitę baltymai buvo nustatyti abiejose grupėse. IUI paplitusių baltymų intensyvumas buvo vienodai pasiskirstęs tarp mėginių.

Baltymų anotacija ir funkcinių procesų įvertinimas

Baltymų anotacijos analizė buvo atlikta ProteomeDiscoverer ir Metascape (2 pav.). Atsižvelgiant į visus nustatytus baltymus visuose mėginiuose (atstovaujančius bendrą celiško gleivių proteomą), dažniausiai pasitaikančios biologinių procesų anotacijos buvo kiti biologiniai (18%) ir kiti metaboliniai (13%) procesai, po jų - ląstelių organizacija (8%), transportas (7%), baltymų metabolizmas (6%) ir signalo transdukcija (6%). Dažniausiai pasitaikančios ląstelių komponentų anotacijos buvo kiti ląstelių komponentai (15%), kitos membranos (13%) ir citozolis (10%), po jų - branduolys (8%), plazminė membrana (8%), ne-struktūrinis ekstraceliulinis (6%) ir ER/Golgi (5%). Dažniausiai pasitaikanti molekulinės funkcijos anotacija buvo kita molekulinė funkcija (39%), po jos - nukleorūgščių jungimosi aktyvumas (6%), citoskeletinis aktyvumas (4%), fermentų reguliavimo aktyvumas (4%) ir signalo transdukcija ar receptorių jungimasis (4%).

Anotacijų pasiskirstymas IUI paplitusių baltymų rinkiniui buvo panašus į bendro celiško gleivių proteomo pasiskirstymą visose trijose GO pagrindinėse šakose. Biologinių procesų anotacijos, kurios parodė ryškiausius dažnio skirtumus tarp IUI paplitusių ir bendrų baltymų rinkinių, buvo: nenustatyti biologiniai procesai (+4,4% IUI paplitusiame rinkinyje), kiti biologiniai procesai (+0,8%), signalo transdukcija (+0,7%), ląstelių adhezija (−1,4%), kiti metaboliniai procesai (−1,3%) ir baltymų metabolizmas (−2,31%). Visų kitų biologinių procesų anotacijų dažnis IUI paplitusiame rinkinyje buvo panašus į bendrąjį rinkinį.

Nevaisingumo gydymo metodai ir celiško gleivių vaidmuo

Vaikelio gimimas yra vienas didžiausių gyvenimo stebuklų. Šiandien vis daugiau porų susiduria su įvairiais iššūkiais siekiant šio stebuklo. Laimei, yra gydymo būdų, prieinamų poroms, kurios susiduria su sunkumais pastojant, kurie gali palengvinti šį natūralų procesą. Apvaisinimas in vitro (IVF) pirmą kartą buvo pristatytas 1970-ųjų pabaigoje, kai gimė pirmasis kūdikis, panaudojus šį metodą. Nevaisingumo gydymas apima įvairius metodus ir technologijas, o vienas dažniausiai naudojamų yra apvaisinimas in vitro (IVF). Nuo pat jo pradžios, naudojant IVF technologiją visame pasaulyje gimė daugiau nei 8 milijonai kūdikių. Nevaisingumo gydymas sukelia įvairias emocijas. Laukimą, nerimą ir gydymo proceso reikalavimus gali lydėti nusivylimas, sumišimas ir pasipiktinimas. Tikime, kad kuo daugiau suprasite apie tyrimus ir gydymo procesą, tuo mažiau nerimo ir susirūpinimo jausite dėl savo situacijos.

Pagalbinės reprodukcijos metodas, kurio metu moters kiaušialąstės apvaisinimas spermatozoidais vyksta moters kūne, vadinamas intrauterine inseminacija (IUI). Intrauterine inseminacija (IUI) atliekama natūralaus ciklo metu ovuliacijos metu arba stimuliuojant ovuliaciją vaistais. IUI metu specialiai paruošti spermatozoidai dedami tiesiai į moters gimdą naudojant specialų kateterį. Šis metodas patrauklus, nes nereikalauja chirurginės intervencijos ar anestezijos. Geriausiai žinoma pagalbinės reprodukcijos technologija pasaulyje yra apvaisinimas in vitro (IVF). Apvaisinimas in vitro (IVF) (ne moters kūne) yra metodas, kai kiaušialąstės paimamos iš moters kūno po stimuliacijos vaistais ir laboratorijoje sujungiami su išvalytais spermatozoidais iš vyro. Šis procesas vyksta mėgintuvėlyje. Tai labai panašu į natūralų apvaisinimą, išskyrus tai, kad embrionai auginami inkubatoriuje, o vėliau perkeliami į gimdą. Kaip ir natūraliame procese, gydymo metu reikalingi reprodukciniai ląstelės. Kiaušialąstės paimamos (aspiruojant iš folikulų) per kiaušidžių punkciją, o spermatozoidai paimami iš spermos mėginio. Jei spermoje nėra spermatozoidų ir diagnozuojama azoospermija, kai kuriais atvejais spermatozoidai gali būti gauti iš sėklidžių per TESA procedūrą. Kad kiaušialąstė būtų apvaisinta, pakanka ją patalpinti į aplinką, kurioje yra šimtai tūkstančių spermatozoidų. Kitaip tariant, jei spermatozoidai negali pasiekti kiaušialąstės arba jei sąlygos moters kūne jiems nėra tinkamos, laboratorijoje sukuriamos idealios sąlygos ląstelių susiliejimui - spermatozoidų ir kiaušialąstės susitikimui. Apvaisinimas įvyksta, kai bent vienas spermatozoidas patenka į kiaušialąstės citoplazmą ir apvaisina branduolį. ICSI (intracytoplasminė spermatozoidų injekcija) pirmiausia sprendžia vyrų nevaisingumo problemas, tokias kaip prastas spermatozoidų judrumas, sumažėjęs spermatozoidų skaičius ir nesugebėjimas prasiskverbti į kiaušialąstę. Naudojant šį metodą, moters kiaušialąstės dedamos į mėgintuvėlį, o tada į kiekvieną kiaušialąstę tiesiogiai suleidžiamas vienas spermatozoidas. Ši procedūra reikalauja didelio embriologo įgūdžių ir atsakomybės, siekiant užtikrinti, kad būtų pasirinktas tinkamiausias spermatozoidas. Jei spermos mėginyje nėra spermatozoidų, juos galima tiesiogiai išgauti iš sėklidžių per TESA procedūrą. Šiaulių „Northway“ vaisingumo centre siūlomos kiaušialąsčių, spermatozoidų ir embrionų donorystės programos.

Nevaisingumo gydymo iššūkiai ir klaidingi įsitikinimai Lietuvoje

Nevaisingumas yra skausminga problema, su kuria susiduria apie 10-15% šeimų (5, 13, 18). Išsivysčiusiose pasaulio šalyse nevaisingumo gydymo metodai pastaruoju metu sparčiai tobulėja, tačiau kai kurie Lietuvos gydytojai praktikai vis dar turi ribotas galimybes susipažinti su šios medicinos srities pasiekimais. Kadangi UAB Eugenijos ginekologijos klinika sulaukia nevaisingų šeimų iš visos Lietuvos, kurios dažnai buvo gydomos daugelyje medicinos įstaigų, norėtume pasidalinti savo mintimis apie dažniausiai nepagrįstai naudojamus tyrimus ir pasenusius gydymo metodus, kurie prieštarauja moderniam endokrininės reprodukcinės sistemos reguliavimo požiūriui. Tekstas buvo labai supaprastintas, kad jį būtų kuo lengviau suprasti eiliniams skaitytojams. Deja, kai kurių medicininių terminų nepavyko išvengti, todėl teksto pabaigoje yra medicininių terminų žodynas.

Estrogenų vartojimas moteriškų lytinių hormonų pirmoje mėnesinių ciklo pusėje. Kartais moteriški lytiniai hormonai - estrogenai vis dar naudojami kiaušidžių funkcijai stimuliuoti. Progestogenų (progesterono, norcolutolio ir kt.) skyrimas nuo 13, 14, 16 ir t. t. dienos. Ovuliacija nebūtinai įvyksta ciklo viduryje. Ji įvyksta 12-14 dienų iki kitų mėnesinių. Jei ciklas yra ilgas, ovuliacija gali įvykti 18, 22 ar net vėlesnę ciklo dieną. Progestogenų skyrimas prieš ovuliaciją slopina ovuliaciją ir apsunkina ovuliacijos diagnostiką, didinant bazinę temperatūrą ir storinant gimdos gleivines. Chorioninis gonadotropinas stimuliuoja androgenų sintezę kiaušidžių folikulų dangalo ląstelėse. Jei chorioninis gonadotropinas (ovidrel, ovitrelle, pregnyl ir kt.) skiriamas prieš pakankamai subrendusį priešovuliacinį folikulą, folikuluose dominuos androgeninė terpė, slopindama estrogenų gamybą bei FSH ir LH receptorių gamybą. Tai blokuoja ovuliaciją ir sukelia folikulų atreziją. Ovuliacijos stimuliacijai chorioninio gonadotropino skyrimas yra pagrįstas tik tuo atveju, jei kiaušidėse yra priešovuliacinis folikulas. Tai galima diagnozuoti ultragarsu. Tokiu atveju chorioninis gonadotropinas skiriamas vienkartine didelė doze, o ovuliacija įvyksta po 12-38 valandų. Šie dariniai yra norethidronas (norcollut), etinodiolio diacetatas, levonorgestrelis, allylestrenolis (turinal) ir kt. netinka geltonkūnio nepakankamumo gydymui, nes jis taip pat jungiasi prie androgenų receptorių audiniuose, jautriuose progestogenams (pvz., gimdos gleivinėje, vaisiaus audinyje).

1. Prematūrinio kiaušidžių išsekimo sindromas, t. y. Skiriant kiaušidžių stimuliatorius nevaisingumui, svarbu stebėti ovuliacijos vystymąsi, pilnavertį ir pakankamai ilgai veikiantį geltonkūnio vystymąsi arba gimdos kaklelio gleivių kokybės „gerumą“. Steino-Leventalio sindromas, taip pat žinomas kaip policistinių kiaušidžių sindromas, policistinių kiaušidžių liga, lėtinės anovuliacijos sindromas. Ultragarsiniai tyrimai parodė, kad policistinių kiaušidžių pakitimai randami 75% moterų, turinčių bet kokios kilmės ovuliacijos sutrikimų, taip pat 25% sveikų vaisingų moterų su normaliais ovuliacijos ciklų. Todėl ultragarsu matomi policistinių kiaušidžių pakitimai toli gražu ne visada yra ligos požymis. Kiaušidžių rezekcija dažnai sukelia sąaugas ir nevaisingumą (18, 21), o jos terapinis poveikis pasireiškia tik tada, kai anovuliaciją sukelia kiaušidėse gaminami androgenai. perteklius. Polycystic ovarian changes do not necessarily indicate the presence of ovulation disorders. Kai sutrikusi ovuliacija, policistinių kiaušidžių pakitimai dažnai yra šių pakitimų rezultatas (1, 12, 13, 20, 21, 24), o ne priežastis, todėl policistinių kiaušidžių pakitimai, rasti operacijos ar ultragarso metu, be papildomų klinikinių ir hormoninių tyrimų turi labai mažą klinikinę reikšmę. Tokiu atveju padidėjusi kiaušidžių rezekcija, diatermokoaguliacija ar lazerinė evakuacija dažnai būna neveiksminga, nes ovuliacijos sutrikimo nesukėlė per didelė androgenų gamyba kiaušidėse (1, 12, 13, 20, 21). Anovuliacija nutukusioms moterims atsiranda dėl laisvųjų lytinių hormonų padidėjimo dėl nutukimo ir sumažėjusio lytinių hormonų jungiamojo globulino kiekio, kurį sukelia insulino sutrikimai, taip pat dėl padidėjusio estrogenų kiekio, gaminamo poodiniame audinyje ir pan. Kiaušidžių chirurginė trauma nereikalingai padidina pooperacinių sąaugų ir jų sukeltos nevaisingumo tikimybę. Šiuolaikiniai tyrimai parodė, kad moterys, sergančios policistinių kiaušidžių liga, neovuliuoja dėl sustorėjusios kiaušidžių kapsulės, kaip manyta prieš 20-20 metų. Chirurginis veiksmas turėtų būti nukreiptas į kiaušidės vidų, siekiant sumažinti androgenų ir galbūt kitų biologiškai aktyvių medžiagų gamybą (5, 9, 12, 13, 18, 21, 24), tuo pačiu minimaliai pažeidžiant kiaušidės paviršių, kad būtų išvengta pooperacinių sąaugų. Logiška manyti, kad chirurginiai lazeriai yra mažiau tinkami šiam tikslui nei kiaušidžių diatermokoaguliacija su pradūrimo elektrodu, nes lazerių, ypač argono, neodimio, poveikis yra sutelktas į garintą objektą arba labai arti jo, todėl kiaušidžių kapsulė yra labiau pažeidžiama, tačiau audiniai kiaušidės viduje paveikiami mažiau. Nors lazerio, argono, neodimio poveikis yra sutelktas į garintą objektą arba labai arti jo, todėl kiaušidžių kapsulė yra labiau pažeidžiama, tačiau audiniai kiaušidės viduje paveikiami mažiau. Nors skirtingų laparoskopinių kiaušidžių nudegimų, evakuacijų, diatermokoaguliacijų technikas palyginti gana sunku, nes naudojama labai įvairi chirurginė technika, neatsižvelgiama į gydymo nepriklausomus kontrolinius tyrimus (3).

Kiaušintakis yra organas su sudėtingomis funkcijomis: jo atvirasis galas „pagriebia“ kiaušialąstę po ovuliacijos. Kiaušintakis palaiko spermatozoidų ir kiaušialąstės gyvybingumą prieš apvaisinimą, sukuria reikiamą mikrovidę apvaisinimui ir ankstyvam kiaušialąstės vystymuisi, „perneša“ apvaisintą kiaušialąstę į gimdą. Kiaušintakių pralaidumas, nustatytas per kiaušintakių plovimą ar hidrotubaciją, turi labai mažą diagnostinę vertę, nes visai neatspindi kiaušintakių funkcinio vientisumo. Ši procedūra yra skausminga ir susijusi su tam tikra komplikacijų (uždegimo, endometriozės išsivystymo) rizika. Fermentų tirpalai (lidazė, tripsinas, chimotripsinas ir kt.), kurie dažnai naudojami terapinėms hidrotubacijoms, dirgina kiaušintakių ir pilvaplėvės gleivines, ir patys gali sukelti aseptinį kiaušintakių ir pilvaplėvės uždegimą bei sukelti sąaugas ir ovuliaciją.

Hipofizė, skydliaukė, kiaušidės ir kt. Kraujo estrogenų lygio tyrimas, nebent siekiama stebėti kiaušidžių stimuliaciją, paprastai neturi klinikinės reikšmės. Estrogenų kiekis kraujyje labai greitai kinta, todėl estrogenų tyrimas paprastai naudojamas tik kontroliuojamos kiaušidžių stimuliacijos atvejais su estrogenų gonadotropinais.

15. „Suplanuotas seksas“ - bandymas mylėtis tik „vaisingomis dienomis“. Anksčiau klaidingai manyta, kad susilaikymas ir retesnis seksas gali pagerinti spermatozoidų kokybę. „Suplanuotas seksas“ ir vaisingų dienų skaičiavimas sukelia nereikalingą emocinę įtampą tarp partnerių, gali sumažinti lytinių santykių dažnumą ir sumažinti pastojimo tikimybę.

Po injekcijų, tablečių, pleistrų ir kt. vartojimo. Sėklidė yra padengta standaus pluoštinio audinio sluoksniu, kurio plonos pertvaros prasiskverbia į sėklidės vidų ir dalija ją į apie 200 piramidiškų skiltelių. Skiltelių viduje yra sėklidžių liaukinis audinys, susidedantis iš vingiuotų sėklinių kanalėlių ir audinio tarp jų. Kiekvienoje skiltyje yra 2-3 vingiuoti kanalėliai, kurie susijungia artėjant prie sėklidžių skiltelių viršūnės, tapdami tiesiais kanalėliais. Apie 90% suaugusios sėklidės tūrio sudaro vingiuoti sėkliniai kanalėliai. Sertolio ląstelės ir jų jungtys supa gemalines ląsteles ir besivystančias gametas kaip atramą. Skiltelių viduje, tarp vingiuotų kanalėlių esančiame jungiamajame audinyje, yra smulkūs kraujagyslės, limfagyslės ir Leydžio ląstelės. Testosterono lygis sėklidžių viduje yra 100 kartų didesnis nei testosterono lygis bendroje kraujotakoje. Tokios didelės testosterono koncentracijos susidarymo mechanizmas slypi pačiose sėklidėse. Iš Leydžio ląstelių testosteronas pirmiausia patenka į vingiuotus kanalėlius per bazinę membraną į Sertolio ląsteles. Jos gamina androgenus jungiantį baltymą (ASB). Tik tie testosterono molekulės, kurios lieka nesusijusios su ASB ir androgenų receptoriais Sertolio ląstelėse, patenka į sėklidžių kraujagysles ir per jas - į sisteminę kraujotaką bei paskirstomos po visą kūną. Taigi, testosterono koncentracija visame kūne esančiame kraujyje daug kartų sumažėja dėl praskiedimo. Kai androgenai patenka į organizmą vaistų pavidalu, jie pirmiausia slopina LH sekreciją hipofizėje. Tai sumažina Leydžio ląstelių stimuliaciją ir dėl to testosterono sintezę Leydžio ląstelėse.

18. Nėštumo atidėjimas po hormoninės kontracepcijos vartojimo „kūno valymui“ yra neteisinga taktika, nes nėra patikimų mokslinių įrodymų, kad hormonai, naudojami hormoninei kontracepcijai, turi neigiamą poveikį būsimam vaisingumui ir būsimų vaikų sveikatai. Priešingai, hormoninės kontracepcijos (tablečių, pleistrų, hormoninių IUD, makšties žiedų, injekcijų) vartojimas gali sumažinti nevaisingumo riziką (14, 22) ir padidinti nėštumo tikimybę kai kurioms moterims, turinčioms menstruacijų sutrikimų, iškart po to, kai jų kontraceptinis poveikis išnyksta. Nepaisant plačiai paplitusių priešingų teiginių, kuriuos pateikia Jungtinės Karalystės Karališkoji akušerių ir ginekologų kolegija, PSO [2] ir kt. Ekspertai teigia, kad nėra patikimų mokslinių įrodymų, jog saugus pirmosios ar bet kurios kitos nėštumo nutraukimo būklės yra susijęs su padidėjusia nevaisingumo ar persileidimo rizika, jei nepasireiškia komplikacijos.

Vis dar yra gydytojų, kurie bando „gydyti“ nevaisingumą sėdimosiomis vonelėmis su jūros druska, homeopatiniais vaistais, įvairiais mikroklišerais, fermentais, žvakučių su ichthyol, dilgėlių arbata, alavijo ekstraktu (Aloes) ir pan. injekcijos, vitaminai E, C, A, B1, B2, B6, elektroforezė su vitaminais, įvairios fizioterapijos procedūros, makšties plovimas soda, makšties „vonelės“ su įvairių kompozicijų mišiniais ir kt. Tokie „gydymo“ metodai neturi nieko bendra su moderniu požiūriu į nevaisingumą ir jo priežastis. Nėra rimtesnių tyrimų, įrodančių bet kokį šių „metodologijų“ veiksmingumą.

Literatūra:

1. Balen AH., Jacobs HS Infertility in practice. 2nd edition.
2. Behrman J., Kistner RW, Patton GW, eds. Progress in Infertility, 3 rd ed. - Baston: - 1988. - P.
3. Cohen J. Laparoscopic procedures for treatment of infertility related to polycystic ovarian syndrome.
4. Daling JR, Spadoni LR, Emanuel I. Fertility after contraception or abortion. Fertil Steril.
5. Erickson GF., Danforth DR. Ovarian control of follicle development. Am J Obstet Gynecol.
6. Prolonged use of oral contraception before a planned pregnancy is ssociated with a decreased risk of delayed conception. Human Reprod.
7. Fertility assessment and treatment or people with fertility problems. Clinical guideline. National Collaborating Centre for Women’s and Children’s Health. Commissioned by the National Institute for Clinical Excellence. February 2004.
8. Fukaya T, Murakami T, Tamura M, Watanabe T, Terada Y, Yajima A. Laser vaporization of ovarian surface in polycystic ovary disease in reducedovarian hyperstimulation and improved pregnancy rates.
9. Gast MJ. Evaluation of clinical agents for ovulation induction.
10. Huggins GR, Cullins VE. Fertility after contraception or abortion. Fertil Steril.
11. Imani B, Eijkemans MJ, te Velde ER, Habbema JD, Fauser BC. Predictors of patients remaining anovulatory during clomiphene citrate induction of ovulation in normogonadotropic oligoamenorrheic infertility.
12. Klimas V., J.Ališauskas. Lėtinės anovuliacijos sindromas.
13. Klimas V. Rinktinės ginekologinės endokrinologijos temos.
14. Klimas V., Žaliūnas B. Šeimos planavimo metodai. Vadovas gydytojams.I dalis. Hormoninė kontracepcija.
15. Li TC, Saravelos H, Chow MS, Chisabingo R, Cooke ID. Factors affecting the outcome of laparoscopic ovarian drilling for polycystic ovarian syndrome in women with anovulatory infertility.
16. Olive DL. The role of gonadotropins in ovulation induction.
17. RCOG.
18. Rose BI.
19. Safe abortions: technical and policy guidance for health care systems. Geneva. WHO.
20. Seibel M. M. Infertility. A comprehensive text, 2nd .ed. Stamford, 1997.-P.
21. Speroff L. Fritz M. A. Clinical gynecologic endocrinology and infertility, 7 th ed. Baltimore. - 2004. - P.
22. Stankevičius H., Klimas V. Hormonai ir kontracepcija. Metodiniai nurodymai gydytojams.Vilnius, 2000, - p.
23. Straus J.F., Steikampf M. P.
24. Straus J.F., Barbieri R.L. Yen and Jaffe‘s reproductive endocrinology. Physiology, pathophysiology and clinical management. 5th edition. Elsevier Saunders.

Žodynas:

• Androgenai - vyriški lytiniai hormonai.
• Bazinė membrana - labai plona plėvelė, matoma tik per mikroskopą, ant kurios yra įvairių kūno epitelinių struktūrų epitelinės ląstelės: pvz.
• Egzogeniniai - gaunami iš aplinkos, pvz.
• Estrogenai - moteriški lytiniai hormonai, gaminami kiaušidžių folikulų per pirmąją mėnesinių ciklo pusę. Tam tikras kiekis estrogenų taip pat gaminamas poodiniame riebaliniame audinyje ir pan.
• Folikulai - pūslelės moters kiaušidėse, kuriose vystosi moteriškos lytinės ląstelės - kiaušialąstės.
• Folikulai - pumpurai - pirminė folikulų vystymosi stadija.
• Folikulas - priešovuliacinis - galutinė kiaušidžių folikulo vystymosi ir brendimo stadija, kai jis yra pasirengęs ovuliacijai.
• Gestagenai - progesteronas ir kiti moteriški lytiniai hormonai, turintys panašų poveikį.
• Granuliuotos ląstelės - ląstelės folikulo viduje, kurios gamina estrogenus iš androgenų pirmojoje mėnesinių ciklo pusėje.
• Insulinas - kasos gaminamas hormonas, reguliuojantis cukraus patekimą į ląsteles.
• Kiaušidžių rezekcija - operacija, kurios metu pašalinama dalis kiaušidžių audinio.
• LH (liuteinizuojantis hormonas) - hipofizės išskiriamas baltyminis hormonas į kraują, kuris stimuliuoja vyriškų lytinių hormonų gamybą vyro sėklidėse ir moters kiaušidėse.
• Kiaušidės - moteriškos lytinės liaukos, esančios mažajame dubenyje.
• Polycystic ovarian lesions - tiriant ultragarsu, kiaušidėse matomi daugybiniai 3-10 mm dydžio cistai, t. y. skysčiu užpildyti „pūslės“.
• Receptoriai - ląstelių dariniai, prie kurių prisijungia atitinkami hormonai. Hormonų molekulių prisijungimas prie receptorių inicijuoja biocheminių procesų grandinę, užtikrinančią hormonų poveikį organizme. Pvz.
• FSH (folikulus stimuliuojantis hormonas) - hipofizės išskiriamas hormonas, skatinantis folikulų vystymąsi kiaušidėse.
• Sperma - arba spermatozoidai, vyriškos lytinės ląstelės.
• Testosteronas - pagrindinis vyriškas lytinis hormonas. Vyrams testosteroną gamina sėklidės ir antinksčiai.
• [1] angl.: Royal College of Obstetriciants and Gynaecologists - oficialus D.

tags: #muco #cervicale #e #sterilita